石蜡切片的制作过程
一、实验目的
石蜡切片技术是生物学和医学研究中的一种重要技术手段，通过对组织进行石蜡包埋、切片和染色，可以在显微镜下观察组织的结构和形态，为研究提供重要的形态学依据。本实验旨在让学生掌握石蜡切片的制作过程，为后续的实验课程打下基础。
二、实验材料
1. 组织样品：选取需要观察的动物或植物组织，如肝、肾、肌肉等。
2. 石蜡：用于对组织进行包埋，应选择优质的石蜡，如新加坡产的熔点为54-56℃的石蜡。
3. 切片刀：用于将组织切成薄片。
4. 载玻片：用于放置切好的组织切片。
5. 染色剂：苏木精-伊红染色液（H-E染色），用于对组织切片进行染色。
6. 酒精、二甲苯等试剂：用于对组织切片进行脱水和透明处理。
三、实验步骤
1. 样品准备：将选取的组织样品放入
2.5%戊二醛固定液中，固定2-4小时，以保持组织形态。然后用70%酒精将组织样品洗涤3次，每次10分钟。
2. 脱水处理：将固定后的组织样品依次放入70%、80%、90%的酒精中各1小时，使组织内的水分逐渐被酒精取代。然后放入无水酒精中2次，每次1小时，使组织完全脱水。
3. 透明处理：将脱水后的组织样品放入二甲苯中15分钟，使组织变得透明。然后更换新的二甲苯，再浸泡15分钟。
4. 浸蜡处理：将透明后的组织样品放入熔化的石蜡中，使石蜡渗透到组织中。然后取出组织样品，用纸巾吸去表面多余的石蜡。将组织样品放入包埋模具中，用热台将其固定。
5. 切片：将包埋好的组织样品固定在切片机上，调整刀片的角度和厚度，切成薄片。然后将切好的组织切片用镊子轻轻取下，放在载玻片上。
6. 染色：将载有组织切片的载玻片放入染色架中，用H-E染色液进行染色。先在染色架中加入苏木精染液，染色5-10分钟，然后用伊红染液染色5分钟。最后用盐酸酒精分色，再用水冲洗掉多余的染料。
7. 脱水、透明和封片：将染色后的组织切片依次放入无水酒精和二甲苯中进行脱水、透明处理。然后将透明后的切片放回载玻片上，用中性树胶进行封片。